引言

γδ T 细胞作为组织驻留免疫细胞的重要组成部分，在局部免疫监视中扮演着独特角色。表型上，除 TCR 外，γδ T 细胞通常还表达水平不等的自然杀伤细胞和 1 型固有淋巴样细胞（ILC）的特征性活化受体，这使其能够不依赖于 TCR，直接对应激诱导和转化相关的细胞表面配体作出反应。这些特征，加上其强大的效应功能，使得 γδ T 细胞在控制细胞完整性方面，尤其是在上皮和粘膜组织中，发挥着至关重要的作用。与传统的 αβ T 细胞不同，γδ T 细胞能够感知应激诱导的细胞改变，因此可以独立于 MHC（人类中为 HLA）分子识别转化细胞。在结直肠癌（CRC）和肝细胞癌（HCC）中，γδ T 细胞构成了抗肿瘤免疫反应的重要部分。然而，有证据表明 γδ T 细胞在某些情况下也能促进肿瘤发生。

一、γδ T 细胞的基本特征

在成年人类供体的外周血中，大多数 γδ T 细胞（通常占 CD3 ⁺ T 细胞的 1% 至 10%）表达 V γ 9V δ 2 TCR，V γ 9V δ 2 T 细胞可占循环 γδ T 细胞的 95%。组织驻留的人类 γδ T 细胞则常表达 V δ 1，V δ 1 T 细胞是人类肠道上皮内淋巴细胞（IEL）中的优势群体，也存在于肝脏中，但在外周血中通常占比很小。表达 V δ 3 的 γδ T 细胞在外周血中极为罕见，但在肝脏中约占 20%。这些 TCR 库在人的一生中动态演变，在抗原暴露的驱动下，从儿童早期到成年期的转变过程中，V δ 1 和 V δ 2 γδ T 细胞亚群会发生克隆扩增和组织分布的改变。

人类 γδ T 细胞对配体的识别通常不依赖于 MHC 或 HLA I 类或 II 类分子的呈递，这与大多数 γδ T 细胞缺乏 CD8 和 CD4 共受体一致。被 γδ TCR 特异性识别的配体通常在细胞应激、感染或恶性转化时上调，但有些也表达在健康细胞上。关键的配体包括：

磷酸抗原（pAgs）‍：肿瘤细胞中因甲羟戊酸途径失调而产生的大量异戊烯焦磷酸（IPP），可被 V γ 9V δ 2 TCR 识别。唑来膦酸（ZOL）可通过抑制 IPP 下游的酶，导致 IPP 细胞内积累，从而激活 γδ T 细胞。微生物产生的强效 pAg，如 HMBPP，也能在极低浓度下激活 V γ 9V δ 2 T 细胞。

嗜乳脂蛋白（BTN）家族分子：BTN2A1 和 BTN3A 异构体（尤其是 BTN3A1）是人类 V γ 9V δ 2 TCR 激活所必需的关键分子。pAg 作为分子胶，导致 BTN3A1 和 BTN2A1 构象重排，使 V γ 9 TCR 能够结合并激活。在肠道，BTNL1 – BTNL6 异二聚体（小鼠）和 BTNL3 – BTNL8 异二聚体（人类）对 γδ IEL 的稳态维持至关重要。具体的 γδ TCR 配体汇总见下表：

活化的 γδ T 细胞通常表现出强大的细胞毒性，可通过穿孔素、颗粒酶的分泌途径，或通过 FAS-FAS 配体或 TRAIL-TRAIL 受体的细胞死亡受体途径介导。在体外激活后，人类外周血 γδ T 细胞通常分泌促炎细胞因子，如干扰素 - γ（IFN γ）和肿瘤坏死因子（TNF）。

值得注意的是，γδ T 细胞也存在抑制性机制。例如，通过上调 PDL1、CD39 和 CD73 酶活性产生腺苷、或产生免疫抑制性细胞因子（如 IL-10 和双向调节素 AREG）来削弱有效的抗肿瘤免疫反应。

二、肠道中的 γδ T 细胞

在人类中，γδ T 细胞约占肠道上皮内淋巴细胞（IEL）的 20% 至 30%，在稳态下持续扫描上皮表面，维持上皮屏障。小鼠的 γδ IEL 表达 V γ 7，人类的 γδ IEL 则表达 V γ 4，两者均由 BTNL 分子的相互作用进行选择与维护。BTNL3 – BTNL8 异二聚体与人类 γδ T 细胞的直接结合，通过生殖系编码的基序感知 " 常态 "。γδ T 细胞还通过产生生长因子（如角化细胞生长因子 KGF）促进肠上皮再生。人和小鼠肠道 γδ T 细胞的特征及其位置分布总结如下图所示。

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三、结直肠癌（CRC）中的 γδ T 细胞

在人类 CRC 中，约 4% 的 TIL 为 γδ T 细胞，其中 V δ 1 T 细胞比 V δ 2 更常见，也可见到数量可观的 V δ 3 T 细胞。尽管在疾病早期 γδ TIL 丰度增加，但在晚期阶段 V δ 1:V δ 2 比例显著升高。大多数临床研究将 γδ T 细胞视为有利的预后标志物。

γδ TIL 的功能既包括抗肿瘤活性，也包括促肿瘤活性。

抗肿瘤：V γ 9V δ 2 T 细胞可杀死自体癌细胞，V δ 1 和 V δ 2 γδ TIL 均在不同程度上表达细胞毒性标志物。

促肿瘤 / 免疫抑制：瘤内 V δ 1 T 细胞可能功能障碍或免疫抑制，机制包括由于持续激活而获得 PD1、TIM3 或 TIGIT 等耗竭标志物；分泌 AREG 促进肿瘤细胞增殖；通过 CD39/CD73 产生腺苷抑制其他 T 细胞增殖。

在小鼠中，γδ T 细胞是 IL-17 的主要来源，可驱动多种肿瘤的恶化和转移形成。但在人类 CRC 中，这种关系并不明确。尽管有研究检测到 V δ 1 TIL 可产生 IL-17，但其他研究只检测到非常低水平的 IL-17 分泌。在多项单细胞 RNA 测序分析中，也并未揭示出 γδ TIL 具有显著的 IL-17 产生潜力。这表明 IL-17 驱动的促肿瘤作用在小鼠和人类 CRC 中的病理生理学相关性存在深刻差异。

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四、肝癌中的 γδ T 细胞

与外周血相比，γδ T 细胞在肝脏中更常见，可占人和小鼠 CD3 ⁺ T 细胞的 25%。高达 20% 的人肝内 γδ T 细胞表达 V δ 3，它们可通过 CD1d 识别脂质，也可以在 HBV 和 HCV 感染中调节免疫反应。

在 HCC 中，γδ T 细胞可通过 TCR 依赖和 NK 细胞受体依赖的方式杀死 HCC 细胞。研究显示，瘤内 γδ T 细胞数量的增加通常与更好的预后相关。然而，局部免疫抑制性肿瘤微环境（TME）和代谢重编程会导致 γδ TIL 功能障碍，表现为杀伤能力减弱及检查点分子 LAG3 表达上调。

研究发现，HCC 患者瘤内 V δ 2 T 细胞群减少，而 CD69 ⁺ V δ 1 T 细胞群增加。其中，CD69 ⁺ V δ 1 T 细胞（尤其是表达 CD49a 或 CD103 的 T 细胞）具有更强的效应功能和杀伤能力，并与更好的总生存期相关。这些驻留型 γδ T 细胞可以从肝脏再循环到血液，其在外周血中的频率与 HCC 患者的总生存期增加正相关。

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五、γδ T 细胞在免疫治疗中的应用

鉴于 γδ T 细胞的强大细胞毒性和 HLA 非依赖性作用模式，人们越来越有兴趣将其用于癌症免疫治疗。其主要优势包括能够从健康供体建立 " 即用型 " 产品，无需 HLA 匹配，且在过继输注后不引起移植物抗宿主病。

体外扩增与过继细胞疗法

V γ 9V δ 2 T 细胞易于扩增，而 V δ 1 T 细胞的扩增更具挑战性，但已建立了高效的 "Delta One T ( DOT ) 细胞 " 体外生成方案。已有一项针对晚期实体瘤（包括 HCC）的 I 期临床研究证实，异体供体来源的体外扩增 V γ 9V δ 2 γδ T 细胞的安全性和耐受性良好。通过在培养体系中添加 IL-15 或维生素 C，可以进一步增强扩增 γδ T 细胞的抗肿瘤效力。

γδ T 细胞是 CAR 转导的理想候选者，因为它们能同时保留内源性 γδ TCR 和活化 NK 细胞受体的表达。针对 CRC 和 HCC 相关的肿瘤抗原（如 MUC1、Glypican 3、GUCY2C、CDCP1）的 CAR γδ T 细胞，已在临床前模型中显示出优于未修饰细胞的疗效。

γδ TCR 靶向策略

双特异性 T 细胞衔接器（BiTEs）‍：将 γδ T 细胞重定向至肿瘤，例如靶向 EGFR 的 BiTE。

γδ TCR-anti-CD3 双特异性分子（GABs）‍：将高亲和力肿瘤反应性 V γ 9V δ 2 TCR 的胞外域连接到 CD3 结合部分，重定向 αβ T 细胞的抗肿瘤反应性。

TEGs：将 αβ T 细胞工程化为表达选定的高亲和力肿瘤反应性 γδ TCR。

体内靶向：通过激动性抗 BTN3A 抗体（如 ICT01）可在体内激活 V γ 9V δ 2 T 细胞，其安全性和有效性在临床试验中表现良好。

协同策略

联合检查点抑制剂（ICB）‍：在 CRC 中，对于 HLA I 类表达缺失（因 B2M 突变）的患者，接受 PD1 加 CTLA4 联合阻断治疗后，观察到与 V δ 1 和 V δ 3 相关基因表达升高，提示 γδ T 细胞可能介导了这些患者的抗肿瘤反应。此外，靶向 TIGIT、NKG2A 等检查点的阻断策略也被证明可以恢复 γδ T 细胞的活性。

改善肿瘤微环境（TME）‍：CRC 和 HCC 的免疫抑制性 TME 是成功免疫治疗（包括 γδ T 细胞疗法）的主要障碍。应对策略包括：应用 STING-TLR 激动剂将 " 冷 " 肿瘤转变为 " 热 " 肿瘤；使用 ZOL 纳米颗粒敏化肿瘤细胞；应用表观遗传修饰剂上调 NKG2D 配体；以及代谢调控（如高氯化钠培养以增强 T 细胞代谢适应性）。

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结语

γδ T 细胞在调节肠道稳态和免疫监视中发挥核心作用。尽管存在促肿瘤潜能，但其强大的抗肿瘤活性，特别是 HLA 非依赖性识别肿瘤细胞和作为 " 即用型 " 产品来源于健康供体的特性，非常适合用于 CRC 和 HCC 的免疫治疗。未修饰的 γδ T 细胞可能缺乏临床效力，但通过 γδ TCR 工程化（CARs、TEGs）和双特异性抗体（BiTEs、GABs）等策略，结合选择性 ICB 和 TME 调节，γδ T 细胞的独特特性将为肿瘤免疫治疗开辟新的前景。

参考资料：

γδ T cells in colorectal and liver cancer. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2026 Apr 22.